肿瘤坏死因子等实验研究性

肿瘤

一、实验动物及试剂
　　(一) 实验动物　Wistar雄性大鼠80只，体重150～200克，由同济医科大学实验动物中心提供。
　　(二) 人肿瘤坏死因子(TNF-α)酶联免疫检测　试剂盒由北京邦定生物医学公司供给。
　　(三) D-GLaN　解放军防化研究院精细学部提供。
　　(四) 血清FP测定　试剂由中国医学科学院放射医学研究所提供。
　　二、方法
　　将实验动物随机分为正常对照组与肝坏死组，每组40只，肝坏死组动物实验前禁食8小时，然后以900mg/kg［1］的剂量，一次性腹腔注射D-GLaN，4个小时后自由饮水进食。正常对照组亦按相同方式，一次注射生理盐水，各组分别于注射前及注射后24小时、48小时和72小时随机取出10只大鼠放血，检测TNF、FP、TB、ALT和PT五项指标，并在肝中叶一定部位取肝组织HE染色，做常规病理检查。血浆TNF测定采用ELISA双抗体夹心法，首先绘出TNF标准曲线，以酶标阅读仪测A值，然后在标准曲线上求出TNF含量，以ng/ml表示；血清FP测定用放射免疫学方法由中国医学科学院放射医学研究所协助完成。其余指标均按常规方法测定。

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